Ehilà! In qualità di fornitore di cellule Tet-213, sono davvero entusiasta di condividere con te come eseguire lo screening dell'aptamero sulle cellule Tet-213. Lo screening degli aptameri è un processo interessante che può aiutarci a trovare queste speciali sequenze corte di acidi nucleici, gli aptameri, che possono legarsi a bersagli specifici con elevata affinità e specificità. E quando si tratta delle cellule Tet-213, c'è un mondo di possibilità completamente nuovo!
Prima di tutto, parliamo un po' delle celle Tet - 213. Queste cellule sono piuttosto uniche e hanno varie applicazioni nella ricerca biologica. Puoi trovare maggiori dettagli su di loro sul nostro sito webTet-213.
Preparazione per lo screening degli aptameri
Prima di passare al processo di screening vero e proprio, dobbiamo preparare le cose. Il primo passo è coltivare correttamente le cellule Tet-213. Vuoi assicurarti che siano in uno stato sano e che crescano bene nel giusto terreno di coltura. Di solito utilizziamo un terreno specifico che fornisce tutti i nutrienti di cui queste cellule hanno bisogno per prosperare.
Successivamente, dobbiamo preparare la libreria aptamer iniziale. Questa libreria è come un grande pool di diverse sequenze di acidi nucleici. Contiene milioni o addirittura miliardi di aptameri diversi, ciascuno con una sequenza unica. Utilizzeremo questa libreria per avviare il processo di screening.
Il processo di screening
Ora entriamo nel vivo dello screening dell'aptamero sulle cellule Tet-213. Il metodo più comune è chiamato Evoluzione sistematica dei ligandi mediante arricchimento esponenziale (SELEX). Ecco come funziona passo dopo passo:
Passaggio 1: incubazione
Prendiamo la libreria aptamer e la mescoliamo con le cellule Tet - 213. Li lasciamo incubare per un certo periodo, solitamente qualche ora. Durante questo periodo, gli aptameri nella libreria avranno la possibilità di legarsi alla superficie delle cellule Tet-213. Alcuni aptameri si legheranno fortemente, mentre altri non si legheranno affatto.
Passaggio 2: separazione
Dopo l'incubazione è necessario separare gli aptameri legati alle cellule da quelli che non lo sono. Ci sono alcuni modi per farlo. Un metodo comune è utilizzare la centrifugazione. Giriamo la miscela ad alta velocità e le cellule con gli aptameri legati formeranno un pellet sul fondo della provetta, mentre gli aptameri non legati rimarranno nel surnatante.
Passaggio 3: eluizione
Una volta separati gli aptameri legati, dobbiamo toglierli dalle cellule. Questa è chiamata eluizione. Usiamo un tampone speciale per rompere i legami tra gli aptameri e le cellule. Dopo l'eluizione, abbiamo una raccolta di aptameri che hanno un'affinità maggiore per le cellule Tet-213 rispetto alla libreria originale.
Passaggio 4: amplificazione
Il numero di aptameri che otteniamo dopo l'eluizione è solitamente piuttosto piccolo. Dobbiamo quindi amplificarli. Usiamo una tecnica chiamata reazione a catena della polimerasi (PCR). La PCR è come una fotocopiatrice per DNA o RNA. Può realizzare milioni di copie degli aptameri in breve tempo.
Passaggio 5: iterazione
Il processo di screening non termina dopo un round. Di solito ripetiamo più volte le fasi di incubazione, separazione, eluizione e amplificazione. Ogni round è chiamato ciclo di selezione. Ad ogni ciclo, ci avviciniamo sempre di più alla ricerca degli aptameri con la massima affinità e specificità per le cellule Tet-213.
Valutazione degli aptameri selezionati
Dopo diversi cicli di selezione, abbiamo un gruppo di aptameri che riteniamo siano buoni candidati. Ma non possiamo semplicemente supporre che siano perfetti. Dobbiamo valutarli.
Un modo per valutare gli aptameri è misurare la loro affinità di legame. Possiamo utilizzare tecniche come la risonanza plasmonica superficiale (SPR) o la calorimetria di titolazione isotermica (ITC). Questi metodi possono dirci quanto fortemente gli aptameri si legano alle cellule Tet-213.
Dobbiamo anche verificare la specificità degli aptameri. Vogliamo assicurarci che si leghino solo alle cellule Tet-213 e non ad altri tipi di cellule. Possiamo farlo testando gli aptameri contro diverse linee cellulari.
Applicazioni di aptameri selezionati da cellule Tet - 213
Gli aptameri che selezioniamo dalle cellule Tet-213 possono avere una vasta gamma di applicazioni. Ad esempio, possono essere utilizzati nei test diagnostici. Possiamo collegare questi aptameri a sensori o altri dispositivi di rilevamento. Quando le cellule Tet-213 sono presenti, gli aptameri si legheranno ad esse e il sensore potrà rilevare il legame, dandoci un segnale.
Possono anche essere utilizzati nella somministrazione mirata di farmaci. Possiamo attaccare farmaci agli aptameri. Poiché gli aptameri hanno un'elevata affinità per le cellule Tet-213, possono trasportare i farmaci direttamente a queste cellule, aumentando l'efficacia del trattamento e riducendo gli effetti collaterali.
Altre considerazioni
Durante il processo di screening dell'aptamero, ci sono alcune altre cose che dobbiamo tenere a mente. Ad esempio, la qualità delle cellule Tet-213 è fondamentale. Se le cellule non sono sane o sono contaminate, ciò può influenzare i risultati dello screening.
Inoltre, le condizioni dello screening, come la temperatura, il pH e la composizione del tampone, possono avere un impatto sul legame degli aptameri alle cellule. Dobbiamo ottimizzare queste condizioni per ottenere i migliori risultati.
Peptidi correlati
Se sei interessato ad altri peptidi correlati, offriamo ancheDinorfina A (1 - 13), Ammide, SuinoESegmento di connessione della fibronectina di tipo III (1 - 25). Questi peptidi hanno proprietà e applicazioni uniche nella ricerca biologica.
Conclusione
L'esecuzione dello screening dell'aptamero sulle cellule Tet-213 è un processo entusiasmante e gratificante. Ciò può portare alla scoperta di aptameri con elevata affinità e specificità per queste cellule, che possono essere utilizzati in varie applicazioni. In qualità di fornitore di celle Tet-213, siamo qui per supportarti nella tua ricerca. Se sei interessato all'acquisto di cellule Tet-213 o hai domande sullo screening degli aptameri, non esitare a contattarci e avviare una discussione sull'approvvigionamento. Non vediamo l'ora di lavorare con te!
Riferimenti
- Ellington, AD e Szostak, JW (1990). Selezione in vitro di molecole di RNA che legano ligandi specifici. Natura, 346(6287), 818 - 822.
- Tuerk, C. e Gold, L. (1990). Evoluzione sistematica dei ligandi mediante arricchimento esponenziale: ligandi dell'RNA alla DNA polimerasi del batteriofago T4. Scienza, 249(4968), 505 - 510.
- Jayasena, SD (1999). Aptameri: una classe emergente di molecole che rivaleggiano con gli anticorpi nella diagnostica. Chimica Clinica, 45(9), 1628 - 1650.