Mezzo di fusione e selezione per ibridomi (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Descrizione del prodotto

产品名称

Nome del prodotto

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Mezzo di fusione e selezione per ibridomi (HAT)

货号 Cat.No

BRS-MED01

规格

Specifica

500ml/瓶

500 ml/bottiglia

产品组分

Componenti

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

Mezzo base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Siero fetale bovino importato (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Mezzo condizionato: 10% (v/v)

Quantità: 100 mg/mL

Penicillina: 100 U/ml

Quantità: 100 mg/mL

Streptomicina: 100 U/ml

次黄嘌呤(ipoxantina):100uM

Ipoxantina: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(timidina):16uM

Timidina: 16 µM

氨基蝶呤(Aminopterina):0,4uM

Aminopterina: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Altri additivi: varie citochine (quantità sufficiente) e integratori

保存条件

Condizioni di conservazione

-20 gradi 保存,有效期 18 个月.

Conservare a -20 gradi. Durata di conservazione: 18 mesi.

使用方法

Istruzioni per l'uso

培养基融化:

水浴融化本培养基 a 37 gradi,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Scongelamento del mezzo:

Scongelare il mezzo in un bagnomaria a 37 gradi. Pulire la superficie esterna con etanolo al 70% e posizionarla in una cabina di biosicurezza per l'uso.
Nota: la comparsa di una piccola quantità di materiale flocculante bianco dopo lo scongelamento è normale. Lasciare riposare il terreno per 3–5 minuti affinché i fiocchi si depositino sul fondo, quindi raccogliere con attenzione il surnatante per l'uso.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 gradi 5% CO2 培养箱静置培养.

Fusione cellulare e semina:

Eseguire la fusione cellulare utilizzando metodi fisici (elettrofusione) o chimici (PEG convenzionali). Risospendere le cellule fuse direttamente in questo mezzo ad una densità e un volume appropriati:

Elettrofusione: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ cellule/pozzetto

Fusione PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ cellule/pozzetto
Volume consigliato: 200 µl/pozzetto in una piastra da 96 pozzetti.
Incubare a 37 gradi, 5% CO₂ per la coltura.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Sostituzione media:

Nei giorni 4–8 successivi alla-fusione, eseguire la sostituzione parziale o completa del mezzo in base allo stato di crescita delle cellule.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Screening cloni:

Quando i cloni cellulari nei pozzetti raggiungono una dimensione adeguata, eseguire lo screening dei cloni positivi.

注意事项

Precauzioni

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Questo prodotto è tossico ed è destinato esclusivamente alla selezione e alla coltura di cellule di ibridomi. Non deve essere utilizzato per l'allevamento di animali vivi, per scopi diagnostici o per applicazioni terapeutiche.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Questo prodotto è adatto per la selezione e la coltura di cellule di ibridoma utilizzando il sistema di selezione HGPRT. Non è applicabile per TK o altri sistemi di selezione. Questo terreno non può essere utilizzato per la coltura diretta di cellule carenti di HGPRT- (ad esempio, NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液, pH 为 7.2~7.4,取用需在无菌条件下进行.

Questo prodotto è una soluzione sterile con un pH compreso tra 7,2 e 7,4. Tutta la manipolazione deve essere eseguita in condizioni asettiche.