Mezzo di espansione e subclonazione cellulare di ibridoma

产品信息 Descrizione del prodotto

产品名称

Nome del prodotto

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Mezzo di espansione e subclonazione delle cellule di ibridoma

货号 Cat.No

BRS-MED02

规格

Specifica

500ml/瓶

500 ml/bottiglia

产品组分

Componenti

DMEM基础培养基:80%(体积比)

Mezzo base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Siero fetale bovino (FBS, importato): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Mezzo condizionato: 10% (v/v)

Quantità: 100 mg/mL

Penicillina: 100 U/ml

Quantità: 100 mg/mL

Streptomicina: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Altri additivi: fattori di proliferazione-singolacellulare e integratori di piccole molecole

保存条件

Condizioni di conservazione

-20 gradi 保存,有效期 18 个月.

Conservare a -20 gradi, durata di conservazione 18 mesi

使用方法

Istruzioni per l'uso

培养基融化:

水浴融化本培养基 a 37 gradi,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Scongelamento del mezzo:

Scongelare il mezzo in un bagnomaria a 37 gradi. Pulire la superficie esterna con etanolo al 70% e riporla in una cappa di biosicurezza per l'uso.
Nota: la comparsa di una piccola quantità di materiale flocculante bianco dopo lo scongelamento è normale. Lasciare riposare il terreno per 3–5 minuti affinché i fiocchi si depositino, quindi raccogliere il surnatante per l'uso.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

Gestione dei pozzetti di fusione – Cellule sane:

Per i pozzetti di fusione con cellule in buone condizioni (ad esempio, colore medio normale o leggermente giallo, le cellule al microscopio appaiono sane, luminose e di dimensioni normali), pipettare delicatamente su e giù con una punta di pipetta gialla. Contare le cellule e la piastra a 0,8–1,5 cellule/pozzetto in 200 µ l di terreno.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Gestione dei pozzi di fusione – celle non ottimali:

Per i pozzetti di fusione con cellule in condizioni non ottimali (ad esempio, terreno acidificato/giallo o cellule che appaiono raggrinzite e scure al microscopio), sono disponibili due opzioni per la successiva subclonazione:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Opzione 1: trasferire le cellule dal pozzo di fusione in una piastra da 24 pozzetti contenente 1 mL di questo mezzo. Dopo 2–3 giorni di espansione, contare le cellule ed eseguire la subclonazione a 0,8–1,5 cellule/pozzetto in 200 µ l di terreno. In questa fase, il raddoppio delle cellule è limitato ma le condizioni delle cellule sono buone, il che la rende ideale per la subclonazione.

2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% 3-4 celle di CO2, celle di CO2 (0,8-1,5 celle/batteria/200 ul);

Rimuovere con attenzione il surnatante dal pozzetto di fusione utilizzando una punta di pipetta gialla e aggiungere 200 µ l di mezzo fresco per pozzetto. Incubare a 37 gradi, 5% CO₂ per 3–4 ore. Quindi, campionare le cellule, contare ed eseguire la subclonazione a 0,8–1,5 cellule/pozzetto in 200 µl di terreno.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Nota: i sottocloni coltivati ​​con Hybridoma Cell Expansion and Subcloning Medium raggiungono in genere uno stadio adatto per lo screening o l'analisi a valle nei giorni 6–8 successivi alla -subclonazione.